2004年，参演首部电影《十七岁的天空》，凭借周天财一角获得第41届金马奖最佳新人奖 ，和第5届华语电影传媒大奖“最佳新演员”“最佳男演员”提名 。
2006年，凭借《圣棱的星光》，获第41届台湾电视金钟奖“戏剧节目最佳男主 杨祐宁《寒战2》饰何国正
角奖”提名 。2007年4月，与周迅、吴彦祖主演电影《明明》 。
2009年，与陈柏霖、童瑶主演改编自日本青春爱情小说的电影《台北飘雪》，陈柏霖和童瑶在片中饰演一对情侣 。
2010年，参演电影《一页台北》，在剧中与张孝全是情敌 ，该片获得第60届柏林电影节最佳亚洲电影奖 ；10月，与徐若瑄主演电影《背着你跳舞》上映 。
2011年，参演首部电视剧《倾世皇妃》，饰演杀手刘连曦 ；11月，与林志玲、陈坤等主演的电影《幸福额度》上映 ；12月参演电视剧《前男友》，凭借赖志明一角获第47届台湾电视金钟奖戏剧节目最佳男主角奖提名 。
2012年2月，与陈怡蓉、郭采洁主演偶像剧《向前走向爱走》，饰演杜天泽 一角 。
2013年2月，与郭采洁主演电影《大尾鲈鳗》在台湾上映四天，票房破八千万台币，打破《那些年，我们一起追的女孩》纪录 ；8月，主演的电影《总铺师》上映 ；同年拍摄唐嫣主演电视剧《千金女贼》，饰演20世纪30年代的阔少盛介文 。 杨祐宁《捉妖记2》饰云青
2014年，杨祐宁在伊能静首次跨界执导的电影作品《我是女王》中饰演TONY；同年在电影《朝内81号》 中饰演霍连齐。
2015年主演电影《风中家族》 ，在电影《太平轮》 中饰演盛鹏；同年，作为主演参与电影《新步步惊心》的拍摄，定档于2015年8月20日上映 。加盟电影《寒战2》 。
2016年4月28日，与林心如主演的《魔宫魅影》全国公映。 7月8日，与郭富城、彭于晏主演警匪电影《寒战2》上映。 9月15日，战争片《我的战争》上映，饰演司号员张洛东，凭此提名第8届澳门国际电影节最佳男配角奖 。
2017年4月23日，参加的湖南卫视明星自助旅行节目《花儿与少年3·冒险季》播出 ；主演喜剧电影《我不做大哥好多年》 ；7月加盟《真·三国无双》剧组，饰演刘备 。8月11日，搭档刘德华、舒淇主演的冒险动作片《侠盗联盟》上映，在其中饰演技术控陈小宝 ；同年参演电影《捉妖记2》 。
杨祐宁《都挺好》饰石天冬
2018年2月16日，与梁朝伟、白百何、井柏然、李宇春合作主演的合家欢电影《捉妖记2》上映，在其中饰演武功高强，外型俊朗的七钱天师云青 。1月，参演电视剧《都挺好》，饰演出身富贵却向往自由的小饭馆老板石天冬。 9月，在改编自金庸同名小说的新版《天龙八部》中饰演乔峰 。11月，在改编自寐语者小说《帝王业》的大型古装电视剧《帝凰业》中，饰演为爱牺牲一切的三皇子子澹 。
2019年10月，确认出演电视剧《他其实没有那么爱你》，片中饰演财经自媒体撰稿人陈南 。12月1日，主演的援外医疗群像剧《一起深呼吸》开机，饰演急于走出身份认同困境的海归医生李天成 。
杨祐宁成长于“厨艺世家”，从高中就开始学习餐饮。对杨祐宁来说户外运动是一种玩乐，和在健身房里运动不一样。他最喜欢冲浪、滑雪这两种运动，都是因为它们跟自然环境有连接。
当然，对一切考验核心力量和平衡感的运动他都很在行。滑板、划船、跳伞、骑山地车，就算是他不会的运动也愿意去体验。他说，如果有时间他还想去学潜水。在体验冒险项目时，他总是显出足够的热情和能量。“我就是那种有用不完体力的人，喜欢运动，喜欢到处玩，什么都不怕。”
恋情方面，2013年2月9日，杨祐宁在微博上传与郭采洁合照，并形容是“小姐流氓相爱相爱”，女方也坦言把杨祐宁当作结婚对象 。2015年3月16日，与郭采洁分手。
杨祐宁为人谦虚低调（网易娱乐评） ；型男外形兼精湛演技，被视为台湾电影圈小生人选中流砥柱（新浪娱乐评） ；是多金、体贴、帅气的小资男（国际在线评） 。
“不受控”的暖男，让公司放弃“人设”（澎湃新闻评） 。
杨祐宁首次参与警匪片《寒战2》，不止“用力打”，还肩负“催泪”、“悬疑”等多重重任，可谓“《寒战2》胜负手”。《寒战2》首次亮相第19届上海国际电影节，有评价就称赞杨祐宁在《寒战2》中的表现出色：“在于几乎已成戏精的梁家辉演中投对手戏时，杨祐宁竟能不落下尘。”特别是杨祐宁和梁家辉在片中的一场便利店对峙戏份，狠戳观众泪点，获赞不止演技出众，还能打还虐（网易娱乐评）。